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如何選擇合適你實(shí)驗(yàn)需要的抗體?
  • 更新日期:2023-05-26      瀏覽次數(shù):599
    • 抗體種類(lèi)繁多,品牌眾 多,技術(shù)參數(shù)不一,價(jià)格和質(zhì)量更是相差甚大,如何購(gòu)買(mǎi)到高質(zhì)量?jī)r(jià)格合適的抗體,并準(zhǔn)確地做出我們想要的結(jié)果,其中有很多細(xì)節(jié)需要注意。

      一、怎樣選擇適合你實(shí)驗(yàn)需要的抗體?
      1. 一抗選擇要點(diǎn)
      (1)確定抗體的名字,注意中英文名字、它名、亞型等信息。
      (2)確定你的實(shí)驗(yàn)類(lèi)型,Elisa,WB,IHC,ICC,還是FACS。一般抗體的說(shuō)明書(shū)都會(huì)列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過(guò)適用于何種實(shí)驗(yàn)的類(lèi)型,如果抗體說(shuō)明 書(shū)沒(méi)有提及的應(yīng)用類(lèi)型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類(lèi)型,而僅是說(shuō)明尚未經(jīng)過(guò)此種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,請(qǐng)根據(jù)說(shuō)明書(shū)列出的已驗(yàn)證的類(lèi)型來(lái)選擇適合你實(shí)驗(yàn)的 抗體。
      (3)確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬,Human,Mouse,還是Rat。一般抗體說(shuō)明書(shū)都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過(guò)適用于何種物種實(shí)驗(yàn),請(qǐng)根據(jù)說(shuō)明書(shū)列出已驗(yàn)證的種屬來(lái)選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體。
      (4)樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇zui合適的抗體,待測(cè)樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域和樣本在提取和處理過(guò)程中是否會(huì)變性,蛋白空間構(gòu)象的改變,會(huì)影響抗體的免疫親和反應(yīng)。

      (5)單多克隆抗體的選擇。市面上的抗體還是以多克隆抗體為主,一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對(duì)小,檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過(guò)封閉等避免)。

      2. 二抗選擇要點(diǎn)
      (1)種屬來(lái)源。主要根據(jù)一抗種屬來(lái)源來(lái)決定購(gòu)買(mǎi)二抗來(lái)源,如一抗是小鼠來(lái)源,那二抗就買(mǎi)抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
      (2)標(biāo)記物的選擇。有HRP、Biotin、熒光素等標(biāo)記物。一般SP三步法二抗選擇Biotin標(biāo)記的二抗,以與后面的SP結(jié)合反應(yīng),而免疫熒光染色就需要購(gòu)買(mǎi)不同熒光素標(biāo)記的二抗,如羅丹明、FITC、Cy3等常用熒光素。

      二、抗體的穩(wěn)定性
      1. 抗體的穩(wěn)定性是自然界長(zhǎng)期進(jìn)化的結(jié)果??贵w是免疫系統(tǒng)中zui重要的分子之一,其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。在眾多物種中,抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。
      2. 抗體分子的高Tm值。在室溫下,甚至短時(shí)間溫度達(dá)到50-60℃,抗體分子都能維持正確折疊,保持應(yīng)有的活性。
      3. 抗體的純度。采用先進(jìn)的抗體純化技術(shù),確保抗體產(chǎn)品的高純度,保障其抗體產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
      4. 抗體的濃度。高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質(zhì)損失,高濃度的抗體穩(wěn)定性更好,抗體產(chǎn)品中93%的濃度大于0.5mg/ml。

      三、怎樣確定抗體購(gòu)買(mǎi)渠道和品牌?

      東莞市景源實(shí)驗(yàn)科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、全球營(yíng)銷(xiāo)為一體的綜合型高科技企業(yè),憑借良好的信用、可靠的質(zhì)量快捷的物流與專(zhuān)業(yè)的服務(wù),在行業(yè)內(nèi)享有很高的聲譽(yù)。現(xiàn)時(shí)代理以及代理的全球品牌已有40多個(gè),業(yè)務(wù)遍及中國(guó)及海外多個(gè)國(guó)家和地區(qū)。產(chǎn)品包括:標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品、參比制劑、高純有機(jī)試劑、無(wú)機(jī)試劑、生化試劑、分析試劑、金屬有機(jī)催化劑以及實(shí)驗(yàn)全儀器、耗材等600,000余種產(chǎn)品,務(wù)求全面滿(mǎn)足客戶(hù)各種實(shí)驗(yàn)檢測(cè)需求。

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